I. Introducción

Los guineos, bananos y plátanos (Musa spp.) están entre los cultivos más importantes en los países del trópico y el subtrópico. Estos ocupan el cuarto lugar en importancia a escala mundial después del arroz, el trigo y el maíz (Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura [FAO], 2017). Sin embargo, la producción de estos cultivos se encuentra amenazada por el ataque de enfermedades como el Mal de Panamá o marchitez por Fusarium. Esta enfermedad causada por Fusarium oxysporum f. sp. cubense (FOC) representa una de las más destructivas y de importancia económica en el género Musa (Lara, 2009 y Ploetz, 2015).

En la actualidad, la enfermedad Fusariosis que afecta especies del género musa, continúa siendo un problema porque puede permanecer en suelos bananeros infectados por más de 30 años, destruyendo cultivares susceptibles a la raza 1 como el cultivar Gros Michel (AAA), establecido por pequeños y medianos productores de Nicaragua y Costa Rica (Caballero et al., 2011).

Inicialmente se observa clorosis en las hojas más viejas, el amarillamiento comienza a lo largo de los márgenes de la hoja, según avanza llega a la vena central, el pecíolo de la hoja colapsa. Los síntomas internos se caracterizan por manchas marrón – rojizo en el sistema vascular de los rizomas, cormos y pseudotallos, según la enfermedad avanza las hojas más jóvenes se afectan y mueren formándose una falda de hojas muertas alrededor del tallo (Alvarado y Díaz, 2007 y Shew y Lucas, 1991).

El patógeno es un organismo que habita en el suelo y que sobrevive entre los cultivos en los restos de plantas infectados que yacen en el suelo en forma de micelio y en cualquiera de sus formas de esporas, pero lo hace con mayor frecuencia en forma de clamidosporas, sobre todo en las regiones templadas frías. Se propaga a cortas distancias a través del agua y el equipo agrícola contaminado, y a grandes distancias principalmente en los trasplantes infectados o en el suelo que va en ellos. Es frecuente que una vez que un área haya sido infectada por fusarium se mantenga así por tiempo indefinido (Ochoa et al., 2004).

Ploetz y Correll (1988) aseguran que independientemente de su origen, el agua constituye un medio excelente de transporte de las esporas y por lo tanto una inmejorable vía de infección.

Caballero et al. (2011) indican obtención de inóculo de FOC de raíces estériles de la maleza Commelina diffusa.

II. Materiales y métodos

Descripción del estudio desarrollado. El trabajo se realizó en la finca Santa María, ubicada en la comunidad la Chocolata de Rivas, situada entre las coordenadas 11º 41´ Norte, 85º 83´ longitud Oeste, a 120 km de Managua, carretera panamericana Sur y a 54 km de Peñas Blancas (frontera con Costa Rica).

Área de estudio. El trabajo de investigación se estableció en un sistema Taungya, en un área de 1,0 ha, en el que se desarrolla la investigación sobre “Evaluación del crecimiento, potencial de secuestro y fijación de carbono de seis especies forestales en asocio con Mussa balbisiana ABB”.

Las especies forestales se establecieron en julio 2012 con distancia de siembra de 6 x 1,5 m (1100 plantas ha) y el guineo se estableció en julio 2013, entre las calles de las especies forestales con el mismo marco de siembra (1100 plantas ha).

Las especies forestales establecidas en el estudio fueron, Teca (Tectona grandis), Pochote (Bombacopsis quinata), Roble (Tabebuia rosea), Melina (Gmelina arbórea), Cedro real (Cedrela odorata) y Caoba (Swietenia humilis) cada una de ellas se establecieron con y sin asocio de Guineo (Musa balbisiana ABB).

Ubicación de los tratamientos. El área está conformada por tres bloques y 16 parcelas experimentales, en el área de las parcelas asociadas la cantidad de plantas de guineo y especies forestales es de 40 y en las parcelas sin asocio de 24 plantas. Para este estudio solo se trabajó con los bloques 1,2 y 3.

La distancia de siembra de guineo en el área del asocio con las especies forestales correspondió a 1.5 x 6 m para una densidad poblacional por parcela experimental de 40 plantas y 1,111 plantas ha y en el área sin asocio el marco de siembra fue de 3 x 3 m para una densidad poblacional de 24 plantas por parcela experimental y 1,111 plantas ha.

Diseño experimental. El trabajo de investigación se estableció bajo el diseño de bloque incompleto balanceado (González, 2006).

Descripción del estudio. La recolección de los datos sobre la incidencia de Fusarium oxysporum se hizo a través de monitoreos visuales en campo (sintomáticos) y análisis de laboratorio.

Monitoreos. El monitoreo consistió en seleccionar todos los surcos de los tres bloques con guineo, en los cuales se recorrían y se observaban las 576 plantas. Como estaba codificado el número de plantas e hileras, las plantas con síntomas iniciales se marcaban con una cinta plástica de color para darle seguimiento a los síntomas progresivos de las enfermedades en los monitoreos posteriores, verificando de este modo el avance de estos.

Estos monitoreos fueron acompañados con tomas de fotografías, lo que documenta la información pertinente de la enfermedad.

Frecuencia de los monitoreos. Se realizaron cada 7 días, iniciando en la segunda quincena de marzo del 2014 y finalizando en la segunda quincena de marzo del 2015.

Muestreo de plantas enfermas. Para la prueba de campo se tomaron muestras de plantas enfermas o que presentaban las características sintomatológicas del agente causal estudiado, esta se levantaba en una base de datos que llevaba, para esto se cortaba una o dos hojas y se observaba la vascularización de la nervadura, si presentaba síntomas de estrías o rayas rosadas-amarillas o se tornaban café y finalmente negras, al mismo tiempo se procedió a su eliminación, se trasladaban las plantas a un área fuera de la plantación y se cortaron porciones de pseudotallo, vainas, hojas, pedúnculo, y frutos de aproximadamente 5 a 15 cm de longitud, de esa misma muestra se depositaban dentro de un termo con hielo para el transporte del campo a los laboratorios de fitopatología de la Universidad Nacional Agraria, Managua.

Evaluación de la incidencia. La incidencia de la enfermedad se calculó por el número de plantas que presentaron síntomas y se expresó en porcentajes de plantas enfermas según Caballero et al. (2011)

Cuadro 1
Escala de severidad de Fusarium (Mal de Panamá) descrito
por McKinney y Davis (1923)

Cálculo del Área Bajo la Curva de Progreso de la Enfermedad (ABCPE) para Fusariosis

Donde:

xi = Porcentaje de tejido afectado

t = Tiempo (días)

n = número de evaluaciones

Identificación y descripción de fusarium en laboratorio

Análisis patológico de material vegetativo. Previo a la identificación y descripción se realizó el análisis patológico del material vegetativo, se utilizaron técnicas de inducción de crecimiento de hongos, a partir de tejido vegetal enfermo posteriormente se sembró en medios de cultivos como: Agar-Agua (AA) y Papa Dextrosa Agar (PDA) para inducir la esporulación de estructuras reproductivas del patógeno.

Cámara húmeda. Las muestras de tejido vegetal enfermo (hojas) se colocaron en platos petri o cajas plásticas con papel filtro, humedecido con agua destilada estéril para inducir a la esporulación de estructuras fructíferas de los hongos y su posterior identificación mediante el uso de microscopio.

Siembra de trozos de hojas con estructuras fructíferas y tejido infectado en AA y PDA. Se tomaron muestras de tejido con síntomas, se realizaron pequeños cortes en el tallo de manera que solo quedara en la lesión la estructura, luego se dejó reposar en agua destilada estéril por un minuto, se secó con papel filtro y se dejó reposar por 30 segundos, finalmente se sembró en platos Petri. Este procedimiento es el de inducir el desarrollo y crecimiento de estructuras de reproducción. Para la siembra de trozos de tallo con tejido infectado en medio de cultivo Papa Dextrosa Agar (PDA), las muestras fueron primeramente desinfectadas con hipoclorito de sodio al 1% y alcohol histólico por 2 minutos, luego se enjuagó con ADE (Agua Destilada Estéril), se hicieron un total de 4 réplicas por un lapso de tiempo de 15 días, posteriormente se sembraron en platos Petri con PDA; estos platos petri se rotularon de la siguiente manera: nombre del cultivo, fecha de muestreo y nombre de la parcela.

Finalmente, los platos se preservaron a temperaturas de 25-30 grados centígrados. Estos platos se revisaban semanalmente con el propósito de observar estructuras reproductivas.

Identificación de Fusarium Sp. El género de hongo encontrado fue identificado utilizando claves taxonómicas. Las características morfológicas o de crecimiento se observaron en microscopio (Monterrosa, 1996).

Modelo lineal. Caballero (1985). El modelo lineal para un bloque incompleto balanceado con estructura de bloque al azar es:

Yij = µ +τi + ρj +eij, i=1, 2,..., tj =1, 2,..., b

1. µ = Media general

2. pj = Efecto del j-esimo bloque

3. eij = Error experimental

4. σ² = Varianza

Análisis de los datos

Después de haber colectado los datos en el campo, se procedió a ordenarlos por variables en una tabla de datos en Excel, luego cada variable medida fue comparada entre sitios usando análisis (ANDEVA) (InfoStat, 2008) seguido de un análisis de diferencia mínima significativa (LSD). El nivel de significancia a usar fue de (p ≤ 0.05). Para el análisis de varianza se realizaron transformaciones de datos para ajustar los supuestos de ANDEVA. Se utilizó logaritmo en base 10 log(x). Para incidencia y severidad en InfoStat (2008).

Variables:

• Porcentaje de Incidencia de daño de Fusarium Sp

• Índice de severidad de Fusarium Sp

• ABCP Fusarium Sp

III. Resultados y discusión

Comparación del porcentaje de incidencia de Fusariosis (Fusarium sp.)

En el análisis de la varianza, se observó diferencia significativa (=≤0.05). De manera general la incidencia de este agente causal reflejó un comportamiento similar en los bloques de guineo (53 %) y caoba (61 %), seguido de melina (36 %), los bloques de cedro, pochote, roble y teca los síntomas de marchitamiento vascular se presentaron porcentajes de 1.12 % a 1.80 %.

De igual manera Pérez et al. (2013) en su investigación: Efecto del Bio-carbón sobre Fusarium oxysporum f. sp. Cubense y el desarrollo de plantas de banano (Musa AAA), el patógeno presentó síntomas característicos, además en estudios realizados por Scott et al. (2012), En marchitamiento vascular en lechuga, ocasionado por F. o. f. sp. Lactucae, se observó que este agente causal reflejó un comportamiento similar al que se mostró en este estudio.

Comparación del porcentaje de incidencia de Mal de Panamá (Fusarium sp.) en el cultivo de guineo

De manera general se observa que la incidencia de este agente causal se presentó casi en todos los meses de muestreo, sin embargo, el mayor aumento de la enfermedad ocurrió treinta días después del mayor aumento de precipitaciones, esto creó las condiciones favorables para la reproducción del patógeno lo cual permitió registrar la mayor afectación en los meses de noviembre y diciembre del 2014 a 0.53 % de incidencia. Ochoa et al. (2004), en su estudio Dos nuevas formas de especie Fusarium oxysporum, que causa marchitez vascular, y Robles-Carrión et al. (2016) en su estudio Identificación morfológica y molecular de especies de Fusarium asociadas a la marchitez vascular del tabaco (Vasconcellea heilbornii var. pentagona Badillo) demuestran que los síntomas de Fusarium oxysporum aparecen al mes de la infección, o sea que se relaciona con el comportamiento del patógeno en este estudio.

Figura 1
Porcentaje de incidencia de Fusariosis.
Fuente: elaboración propia.

Comparación del porcentaje de severidad de Fusariosis (Fusarium sp.)

En el análisis de la varianza, se observó diferencia significativa (=≤0.05). De manera general la severidad de este agente causal reflejó un comportamiento similar en los bloques de melina (0.41 %), cedro (0.43 %), seguido de pochote (0.38 %), debido a que el asocio con estas especies forestales generan mayor cantidad de sombra y por lo tanto se desarrolla en mayor porcentaje la epifítia, en el estudio realizado por Barrera et al. (2016): Efecto del sombrío sobre la sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis Morelet) en cultivo de plátano cv hartón (Musa AAB Simmonds) en el Caribe húmedo de Colombia, demuestran que el efecto de asocio de forestales con musáceas desarrolla el porcentaje de severidad de los patógenos de origen fungosos, como lo es Fusariosis, coincidiendo el comportamiento del patógeno en nuestro estudio.

Al mismo tiempo Martínez (2003) en su investigación El cultivo de plátano en los llanos orientales en Colombia, demuestra que en las musáceas bajo condiciones de sombrío, el patógeno se desarrolla en altos porcentajes como sucedió en esta investigación.

Figura 2
Porcentaje de severidad de Fusariosis.
Fuente: elaboración propia

Comparación del porcentaje de severidad de Fusariosis (Fusarium sp.)

En el análisis de la varianza, se observó diferencia significativa (=≤0.0001). Los tratamientos guineo (0.13 %) y teca (0.92 %) son los que presentan menor y mayor porcentaje de severidad en la investigación, el tratamiento guineo, va solo, no hay efecto sombrío razón por la cual el porcentaje de afectación del patógeno es menor y el asocio de guineo con teca la epifítia asciende hasta 0.92 % debido a la cantidad de sombra que genera esta planta forestal en asocio con guineo, investigaciones realizadas por Martínez (2003) en su estudio El cultivo del plátano en los llanos orientales y Almodóvar y Díaz (2007) en su investigación de identificación y manejo de sigatoka negra y otras enfermedades de plátano y guineo, señalan que los diferentes niveles de sombrío obtenidos en cultivos de forestales asociados con plátano, libre exposición solar, fueron más sensibles a la sigatoka negra, en los resultados de ambas investigaciones coinciden con el comportamiento de Fusariosis en esta investigación.

Comparación del área bajo la curva del progreso de la enfermedad (ABCPE) de Fusariosis

Se comparó el área bajo la curva de progreso de Fusariosis en guineo, se presenta en la Figura 3. La mayor área bajo la curva se presentó en el bloque del asocio de guineo con teca, seguido de roble y cedro, esto significa mayor oportunidad o mejores condiciones de la enfermedad para que progrese una epifítia mucho más rápido en estos tratamientos con mayor efecto sombrío, en cambio la menor área bajo la curva se presentó en el asocio de guineo con caoba.

Berruezo (2018) en los resultados de su investigación “Caracterización morfológica, biológica y molecular de los complejos Fusarium oxysporum y Fusarium solani asociados al cultivo de Nicotiana tabacum L. en el Noroeste Argentino”, coincide que el comportamiento del ABCPE asciende en condiciones de humedad relativa, al igual que esta investigación.

Además, Castillo-Arévalo y Jiménez-Martínez (2020), en su investigación: Incidencia y severidad de enfermedades asociadas al cultivo de plátano (Musa paradisiaca L.) en Rivas, Nicaragua, describen el aumento del comportamiento del patógeno mediante ABCPE en fincas de mayores condiciones de humedad, lo que favorece el progreso una epifítia mucho más rápido en fincas con mayor humedad relativa.

Al realizar el análisis de varianza y separación de medias para comparar los promedios de ABCPE de Fusariosis, se encontró diferencias significativas (=≤0.05).

Figura 3
Area bajo la curva de progreso de la enfermedad (ABCPE) de de Fusariosis.
Fuente: elaboración propia.

IV. Conclusiones

Se describió los principales síntomas de daño y se calculó la incidencia, severidad y ABCPE de Mal de Panamá en cultivo de guineo. Se identificó Fusariosis como el principal agente patógeno de enfermedades asociadas al cultivo del guineo en Rivas, Nicaragua.

Se encontró que el mayor pico de crecimiento de la enfermedad ocurrió treinta días después del mayor aumento de precipitaciones, esto creó las condiciones favorables para la reproducción del patógeno lo cual demuestra que los síntomas de Fusarium oxysporum aparecen al mes de la infección.

Con los resultados de este estudio se demuestra que el efecto de asocio de forestales de mayor producción de sombra con musáceas favorece el desarrollo sobre el incremento del porcentaje de severidad de los patógenos de origen fungosos, como lo es Fusariosis.

Los diferentes niveles de sombrío obtenidos en cultivos de forestales asociados con musáceas, libre exposición solar, son más propensos al desarrollo de Fusariosis, aumentando el ABCPE, lo que favorece el progreso de la epifítia mucho más rápido en fincas con mayor humedad relativa.

Agradecimiento

El autor de esta investigación agradece a la Universidad Internacional Antonio de Valdivieso (UNIAV), por la financiación económica de este estudio, y a la Universidad Nacional Agraria (UNA) por realizar análisis de laboratorio para identificación del patógeno

V. Lista de referencias

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Caballero, A., Pocasangre, L., Casanoves, F., Jacques, A.,Tapia A., y Ortiz, J. (2011). Uso de aislamientos endofíticos de Trichoderma spp., para el biocontrol del Mal de Panamá (Fusarium oxysporum f. sp. cubense) raza 1 en vitroplantas de banano del cultivar Gros Michel (AAA) en condiciones de invernadero. La Calera, 13(20), 16-23. https://doi.org/10.5377/calera.v13i20.1620

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[1] MSc en Sanidad Vegetal, Docente-Investigador de la Universidad Nacional Agraria (UNA). Correo: trinidad.castillo@ci.una.edu.ni, ORCID: https://orcid.org/0000-0001-6401-0142

Notas de autor